The next steps..
February 27, 2009 by thefellowshipofspongebob
28 feb..macam tak caya jek..dah 2 bulan berlalu utk thn 2009..
erk!! experiment kuuu..setakat ni masih belum ada hasil yang boleh dipublishkan (sighhh..) tapi kan sekurang2nya hari ini saya boleh bernafas dengan lega..beberapa hari sebelum ni saya merasakan seolah2 seperti seekor katak yang dilenyek kereta dikala hujan turun dengan lebat..sungguh sesak rasanya kepala otak ni..
sebenarnya masuk ni dah kali ketiga saya cuba isolate kan NK cells dari peripheral blood..untuk dua kali yang mula2 tu, ‘budak tengah sawah’ yang baik hati mendermakan darahnya..kali pertama, sorting out with the CD16-CD56-FACS method..boleh dapat highly purified NK cells dalam clean medium..tapi sel tu mati lepas sminggu..apsal ntah..mungkin tak cukup kot nak grow sbb rite after dapat seme sel2 tu..dah guna sebahagian utk run experiment..so jumlah yg ada mungkin tak cukup kot untuk support each other utk hidup..ye la kan..bak kate Dian, ‘alaa..kultur sel ni cam Suhana gak, takde kawan takleh hidup..ramai sangat kawan pon boleh mati’ (kui kui..ada gak kebenarannyaa..)..
jadi untuk kali ke2, kami guna NK cells isolation kit pulak..gadis ‘tengah sawah’ yg baik hati wp agak keberatan mdermakan darahnya buat kali ke2 (it costed me a piece of cake & a box of choc actually..:p).. since ni 1st time buat, ‘budak paling ensem kat lab saya’ dengan baik hatinya menolong.. wp pakai kit, but still kena pi lab Dr yasui utk negative selection (paling tak suka buat kerja kat sini..betapa tak friendly nyer environment kat sini, jauh beza ngan lab saya..maybe sbb org kat sini deal ngan virus n blood kot..apa lak bezanya ngan lab saya yg deal ngan cancer??)..
malang utk kali ke2 bila kultur NK sel yg bjaya kami isolate kan contaminate pada keesokan harinya..masa ni saya dah mula memahami perasaan seekor katak yang kegersangan di padang pasir..its like back to square one over n over again..sebabnya tanpa culture yg ni, x mungkin untuk saya proceed ngan steps yg seterusnya..untuk kali yang ke3, ‘om lucu’ cakap dia akan arrange kan untuk pderma darah (bukannya senang jadi ‘blood sucker’ nampaknya)..rupa2nya mangsa saya kali ni adalah ‘orang kaya’..dan dia hampir pengsan lepas kehilangan ‘40 ML’ darah (dia buat lawak aje sebenarnya..but then saya kena kasi dia makan sesuatu supaya boleh ganti balik darah dia yang hilang tu). untuk kali yang ke3, ‘mamat paling ensem’ dan saya sebagai penyokong dan pemberi semangat (sebab saya cuma dok kat sebelah dia aje dan observe: hehe..jangan tak tau, org jepun sangat mudah dimanipulasi..dulu saya tak caya) isolate kan NK cells dengan penuh dan sangat berhati2 supaya tak berlaku sebarang contamination (tu pon dia tertumpahkan buffer yang saya dah sterilekan siap2..nasib baik ada lagi separuh)..
ALHAMDULILLAH..dah dekat seminggu in culture, NK cells tersebut nampaknya sihat dan hopefully akan terus grow dengan banyak dan sihatnyaa..akhirnya nafas saya dah kurang sket tersekat2..legaa..
jadinya selepas 2 bulan dalam tahun 2009 saya hanya bjaya buat primary culture untuk NK cells..but still its a good start..gambarimasu!!
ps: saya tak menggunakan darah sdiri atau kawan2 muslim perempuan yang lain sbb the one n only trusted hematologist kat lab saya cuma ‘budak paling ensem’..dengan kata lain, menjaga adab2 sbg seorang muslim..:)
suN..ko ingat tak dulu aku berbulan2 tak dapat result western blott..takpe..once ko dapat ko akan jadi bapak kepala utk method tu. nape kal ko derma darah??ape yg die akan buat?
ko rasa kalau aku repeat method tu setahun, blh ke ek nk declare diri sdiri sbg ‘bapak method’ ek? hehe..aku ingt..zaman susah senang kita sama2 dulu kan..psl darah tu pulak, xde apa..cumanya x berapa proper aje sbnrnya..